Cinética de citocinas y de anticuerpos en ratones resistentes y susceptibles a la infección por Cryptococcus neoformans / Kinetics of cytokines and antibodies in resistant and susceptible to Cryptococcus neoformans infection mice

La criptococosis, micosis sistémica oportunista que afecta especialmente a individuos inmunocomprometidos, es causada por Cryptococcus neoformmans. Uno de los factores de virulencia de esta levadura es el polisacárido capsular (PSC), compuesto principalmente por el glucuronoxilomanano (GXM), antígeno (Ag) T independiente (TI) con capacidad inmunosupresora. La respuesta humoral específica contra C. neoformans parece condicionar el tiempo de sobrevida de los animales infectados siendo la IgG1 protectora mientras que la IgG3 no lo es. Los mecanismos que regulan el cambio en el isotipo o en la subclase de inmunoglobulina (Ig) no han sido claramente establecidos y aunque se supone la participación de factores solubles como las citocinas, su relación no ha sido aún demostrada. Con base en estas observaciones, el propósito de este trabajo fue estudiar en un modelo murino de criptococosis con el empleo de cepas de ratones resistentes y susceptibles (BALB/c y C57BL/6) infectados intratraquealmente, tanto la producción de anticuerpos (Ac) IgG por las células de bazo como de las citocinas interferón (IFN) gamma, interleucinas (IL) -5, IL-10, IL-12 e IL-18 en diferentes tiempos post-infección. Estos análisis permitieron determinar la producción de Acs IgG in vitro tanto en ratones infectados como en los no infectados siendo mayor en los primeros. A pesar de que la producción de Acs anti-GXM en el día 8 pos-infección fue mayor en C57BL/6 con respecto a BALB/c, se observó una disminución de la cantidad de Acs en los ratones infectdos en ambas cepas en el día 13. Los análisis del mRNA de las citocinas mostraron que en BALB/c existe una pequeña desviación de la respuesta hacia un patrón Th1 en el pulmón, pero no en el bazo, comparada con los C57BL/6. Esta diferencia entre las dos cepas, se observó solamente a nivel de pulmón, es decir en el sitio de la infección. Estos resultados sugieren que en BALB/c el patrón de citocinas Th1 podría condicionar la capacidad de producir Acs in vitro, disminuyéndola, en C57BL/6 el patrón Th2, favorecería la producción de Acs por esta cepa en condiciones similares. La infección por C. neoformans produce una reducción en la producción de Ac por células de bazo, lo que sugiere que la inmunosupresión mediada posiblemente por el GXM tiene acción sistémica. Sería importante analizar la producción de citocinas in vitro frente a este Ag para determinar su implicación en la producción de Acs IgG

Utilización de placas de elisa de alta y de baja avidez en la determinación de anticuerpos contra la toxina de cólera / The use of low and high binding elisa plates in the determination of cholera antitoxin antibodies

Los sueros de estudio de inmunogenicidad de una vacuna oral de células enteras de Vibrio cholerae 01 más la subunidad B recombinante de la toxina (CE/sBr) fueron procesados para la determinación de anticuerpos antitoxina de cólera en placas de elisa de alta y de baja avidez. Los títulos de anticuerpos antitoxina, de la clase IgG, de los sueros prevacunales estuvieron incrementados de 5 a 7 veces, en las placas de alta avidez, comparados con los títulos obtenidos en las placas de baja avidez. Igualmente, los títulos de los sueros post vacunales fueron 3 veces superiores cuando se realizó la misma comparación de placas. Por consiguiente, la tasa de seroconversión medida en las placas de baja avidez fue de 39 por ciento, comparada con el 68 por ciento al utilizar las placas de baja avidez. El suero control de alto título de anticuerpos no detectó el problema. Se sugiere utilizar placas de baja avidez al determinar anticuerpos contra la toxina de cólera por la técnica de elisa

Estudio seroepidemiológico del cólera en Colombia / Seroepidemiological study of cholera in Colombia

La prueba de vibriocida ha sido ampliamente usada para confirmar el diagnóstico clínico de cólera, para medir la inmunogenicidad de las posibles vacunas y como herramienta epidemiológica en estudios de la enfermedad en áreas endémicas y en brotes. A partir de marzo de 1991, Colombia se vió afectada por la primera epidemia de cólera en este siglo; por esta razón, para obtener información adicional sobre el alcance de la epidemia en nuestro medio se planteó la realización de un estudio descriptivo con métodos seroepidemiológicos. Se empleó la prueba vibriocida en micrométodo, con las cepas de Vibrio cholerae 01 El Tor Inaba y El Tor Ogawa, y se definió como resultado reactivo un título mayor o igual a 80 y como infección reciente un título mayor o igual a 640. La población estudiada estaba conformada por 73 pacientes con enfermedad diarreica aguda y por 4.577 consultantes por otras causas. Se procesaron 4.650 sueros de 5 de las 6 regiones del país, afectadas por la epidemia, 1520 obtenidas en 1991, 1.229 en 1992 y 1.901 en 1993. Del total, 21,5 por ciento fueron reactivas, 25 por ciento en 1991, 21,4 por ciento en 1992 y 19 por ciento en 1993. El porcentaje de reactividad global en hombres fue de 24 por ciento y en mujeres, de 20 por ciento. No se encontraron diferencias en el porcentaje de reactividad según la distribución por edad. El porcentaje de infección reciente fue de 10 por ciento. En los pacientes con diagnóstico de cólera, la prevalencia de infección determinada por la reactividad en la prueba vibriocida fue de 68,5 por ciento y de infección reciente del 51 por ciento. El análisis de los resultados de las regiones pacífica y atlántica fue consistente con la evolución epidemiológica de los casos clínicos de colera en esas regiones

Seguridad e inmunogenicidad de la vacuna oral anticólera CVD-103 HgR: estudio en 29 voluntarios / Safety and immunogenicity of the oral anti-cholera vaccine CVD-103 HgR: study in twenty nine volunteers

Con el fin de determinar si la vacuna CVD-103 HgR era segura e inmunogénica, se administró una dosis a 29 voluntarios sanos, en el Laboratorio de Microbiología de Microbiología del Instituo Nacional de Salud. Se anotaron los efectos secundarios durante siete días después de la ingestion de la vacuna. Se tomaron 5 muestras de sangre los días 0,7, 10, 14 y 28 después de la toma de la dosis. Se determinaron los títulos de anticuerpos antibacterianos por medio de la técnica vibriocida y anticuerpos antitoxina IgG e IgA por medio de la técnica de elisa. Nueve voluntarios (31 por ciento) manifestaron efectos secundarios leves (náuseas, dolor abdominal o cefalea) los cuales fueron más frecuentes durante el primero y segundo días después de haber tomado la vacuna. El mayor porcentaje de seroconversión en anticuerpos vibriocidas fue de 93 por ciento a los 7 días, en anticuerpos antitoxina IgG fue de 71,4 por ciento a los 14 días y para antitoxina IgA en igual porcentaje a los 10 días. La mayor media geométrica de anticuerpos vibriocidas fue de 1538 (1.064-2.223) a los 10 días, la de anticuerpos antitoxina IgG fue de 251 (212-297) a los 14 días y para anticuerpos antitoxina IgA fue de 48 (40-57) a los 10 días. Se concluyó que la vacuna era segura e inmunogénica en esta población

Seguridad e inmunogenicidad de la vacuna oral contra el cólera: estudio en 20 voluntarios / Safety and immunogenicity of the oral anti-cholera vaccine againts the cholera: Study in 20 volunteers

Se realizó un estudio de seguridad e inmunogenicidad de la vacuna de células enteras de Vibrio cholerae 01 más la subunidad B recombinante de la toxina (CE/sBr) en 20 voluntarios sanos, en el Laboratorio de Microbiología del Instituto Nacional de Salud. Se suministraron tres dosis de la vacuna con intervalos de dos semanas entre cada una y se recolectaron muestras de sangre el día de la primera dosis y semanalmente durante ocho semanas. Se anotaron los efectos secundarios durante los cinco días siguientes a la ingestión de cada una de las dosis. En los sueros, se determinaron los niveles de anticuerpos antibacterianos empleando la técnica vibriocida y los de anticuerpos antitoxina de las clases IgG e IgA empleando la técnica de ELISA. Se presentaron efectos secundarios leves como náuseas, cefalea y malestar abdominal después de cada una de las dosis en 4, 5 y 2 de los voluntarios. El porcentaje de seroconversión más alto para títulos vibriocida fue del 50 por ciento y la mayor media geométrica fue de 21,38 (15,3-29,85) ambos eventos en la tercera semana. El porcentaje máximo de seroconversión para los anticuerpos antitoxina fue del 84 por ciento en la octava semana para IgG y del 89 por ciento en la sexta semana para IgA y la media geométrica fue de 245,5 (198-305) en la sexta semana para IgG y de 74,13 (60-98) en la tercera semana para IgA. Con estos datos podemos concluir que la vacuna CE/sBr fue segura e inmunogénica en los voluntarios estudiados